ချောင်း microscopy: အနည်းလမ်းကို၏အခြေခံမူ

စုပ်ယူမှုနှင့်အလင်းနောက်ထပ်အော်ဂဲနစ်နှင့်အော်ဂဲနစ်အရည်များပြန်လည်ထုတ်လွှတ်င်း၏သို့မဟုတ်ချောင်း၏ရလဒ်ဖြစ်ပါသည်။ အဆိုပါဖြစ်စဉ်များအကြားခြားနားချက်အလင်း flux ၏စုပ်ယူမှုနှင့်ထုတ်လွှတ်အကြားကြားကာလ၏ကြာချိန်ဖြစ်ပါတယ်။ ဤအဖြစ်စဉ်များ၏ချောင်းနီးပါးတစ်ပြိုင်တည်းစဉ်င်း၏ပေါ်ပေါက်သည့်အခါ - အချို့သောနှောင့်နှေးနှင့်အတူ။

သမိုင်းဆိုင်ရာသတင်းအချက်အလက်များ

1852 ခုနှစ်တွင်ဗြိတိသျှသိပ္ပံပညာရှင်ရမှာပါ, ပထမဦးဆုံးအချောင်းဖော်ပြခဲ့သည်။ သူနှင့်အတူစမ်းသပ်ချက်၏ရလဒ်အဖြစ်အသစ်တခုသက်တမ်းမိတ်ဆက် fluorspar, ခရမ်းလွန်အလင်းအောက်မှာအနီရောင်အလင်းထုတ်လွှတ်ပေးသော။ Stokes စိတ်ဝင်စားစရာကောင်းတဲ့ဖြစ်ရပ်ဆန်းမှတ်ချက်ချသည်။ ဒါဟာချောင်းဓါတ်ရောင်ခြည်၏လှိုင်းအလျားအမြဲတမ်းစိတ်လှုပ်ရှားဖွယ်အလင်း၏စီးဆင်းမှုထက် သာ. ကြီးမြတ်ကြောင်းတွေ့ရပါသည်။

19 ရာစုအတွင်းအယူအဆအတည်ပြုဖို့အများကြီးစမ်းသပ်ချက်ရှိခဲ့ပါပြီ။ သူတို့ကနမူနာအမျိုးမျိုးခရမ်းလွန်အလင်း၏သြဇာလွှမ်းမိုးမှုအောက်မှာ fluoresce ကြောင်းပြသခဲ့သည်။ အဆိုပါပစ္စည်းများအနက်တခြားအရာအကြား, crystals, resins, တွင်းထွက်ပစ္စည်း, လိုရိုဖီးလ်, ရေနံစိမ်းမူးယစ်ဆေးဝါး, အော်ဂဲနစ်ဒြပ်ပေါင်းများ, ဗီတာမင်, အဆီများခဲ့။ ဇီဝစမ်းသပ်မှုများအတွက်ဆိုးဆေးများ၏တိုက်ရိုက်အသုံးပြုမှုကို 1930 ခုနှစ်တွင်သာစတင်

ချောင်း microscopy: ဖော်ပြချက်

20 ရာစုလေ့လာမှုများ၏ပထမတစ်ဝက်တွင်အသုံးပြုသောပစ္စည်းများအချို့သည်မြင့်မားတဲ့ specification ပြ။ стал важнейшим инструментом и в биомедицинских, и в биологических исследованиях. ခြားနားမှုနည်းလမ်းများအားဖြင့်အောင်မြင်မရနိုင်တော့သောစွမ်းဆောင်ရည်မှကျေးဇူးတင်ပါသည်, ချောင်း microscopy ၏နည်းလမ်းပြီးတော့ biomedical နှင့်ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာသုတေသနလုပ်ငန်းအတွက်မရှိမဖြစ်လိုအပ်သော tool ကိုဖြစ်လာသည်။ အညီအမျှအရေးကြီးသောရလဒ်များကိုရယူနှင့်ပစ္စည်းများကိုအဘို့အခဲ့ကြသည်။

? ချောင်း microscopy ၏နည်းလမ်းကဘာလဲအားသာချက်များသနည်း အသစ်သောပစ္စည်းများအသုံးပြုခြင်းဖြစ်နိုင်သောနှင့်မြင့်မားသောတိကျသောဆဲလ် submicroscopic အစိတ်အပိုင်းများ၏ရွေးချယ်ရေးဖြစ်လာသည်။ ချောင်း microscopy တစ်ခုတည်းမော်လီကျူး detect နိုင်ပါတယ်။ ဆိုးဆေးများ၏တစ်ဦးအမျိုးမျိုးတစ်ကြိမ်မှာမျိုးစုံပစ္စည်းများ၏မှတ်ပုံတင်ခွင့်ပြုပါ။ အလှည့်၌, နမူနာများ၏တိကျသောဂုဏ်သတ္တိများအပေါ်မူတည်သည့်ကိရိယာများ၏ diffraction န့်သတ်ချက်များ၏ကန့်သတ် Spatial Resolution, နေသော်လည်း, ဒီအဆင့်ကိုအောက်တွင်ဖော်ပြထားသောမော်လီကျူး၏မှတ်ပုံတင်လည်းအတော်လေးဖြစ်နိုင်ပါတယ်။ irradiation ပြပွဲ autofluorescence ပြီးနောက်အမျိုးမျိုးသောနမူနာ။ ဤဖြစ်စဉ်တွင်ကျယ်ကျယ် petrology, ရုက္ခဗေဒ, ထိုဆီမီးကွန်ဒတ်တာစက်မှုလုပ်ငန်းအတွက်အသုံးပြုသည်။

အင်္ဂါရပ်များ

မကြာခဏရှုပ်ထွေးသို့မဟုတ်လွန်းအားနည်းသို့မဟုတ်အလွန်အားကောင်းတဲ့ unspecific autofluorescence တိရိစ္ဆာန်တစ်ရှူးသို့မဟုတ်ရောဂါပိုးလေ့လာပါ။ သို့သော်လေ့လာမှုများအတွက်တန်ဖိုးအတိအကျလှိုင်းအလျားမှာကြုံရတဲ့ပစ္စည်းအစိတ်အပိုင်းများသို့မိတ်ဆက်စကားရရှိသည်နှင့်လိုအပ်သောအလင်းစီးဆင်းမှုပြင်းထန်မှု emitting ။ Fluorochromes လွတ်လပ်စွာအဆောက်အဦများ (မြင်နိုင်သို့မဟုတ်မမြင်ရတဲ့) ကိုပူးတွဲနိုင်စွမ်းဆိုးဆေးများအဖြစ်ဆောင်ရွက်ရန်။ ထို့ကြောင့်သူတို့ကပစ်မှတ်တစ်ခုအမြင့်ဆုံးကိုရွေးချယ်ပါ, ထိုကွမ်တမ်အထွက်နှုန်းရှိသည်။

стала широко применяться с появлением естественных и синтетических красителей. ချောင်း microscopy ကျယ်ပြန့်သည့်သဘာဝနှင့်ဒြပ်ဆိုးဆေးများ၏ထွန်းကတည်းကအသုံးပြုခဲ့ပြီ။ သူတို့ကထုတ်လွှတ်ခြင်းနှင့်စိတ်လှုပ်ရှားဖွယ်အချို့ပြင်းထန်မှု profile များကိုသိမ်းယူနှင့်တိကျသောဇီဝပစ်မှတ်ဖို့ပစ်မှတ်ထား။

တစ်ဦးချင်းစီမော်လီကျူး၏ identification

မကြာခဏဆိုသလိုစံပြအခြေအနေများအတွက်, သင်ကသီးခြားဒြပ်စင်အလင်းရောင်မှတ်ပုံတင်ရန်နိုင်ပါတယ်။ ဒီအဘို့, အခြားအမှုအရာတို့ကိုအကြားက detector နှင့် optical နောက်ခံတစ်ခုလုံလုံလောက်လောက်အနိမ့်ဆူညံသံများကိုလိုအပ်သောဖြစ်ပါတယ်။ ကြောင့် 300 တထောင်အထိထုတ်လွှတ်နိုင်ပါတယ် photobleaching ပျက်ကွက်ဖို့ fluorescein မော်လီကျူး။ ဖိုတွန်။ အဆိုပါလုပ်ငန်းစဉ်၏ 20% စုဆောင်းခြင်းထိရောက်မှုမှာ 60 ခန့်တထောင်တစ်ခုငွေပမာဏမှာသူတို့ကို register နိုင်ပါတယ်။

, основанная на лавинных фотодиодах или электронном умножении, позволяла исследователям наблюдать поведение отдельных молекул на протяжении секунд, а в ряде случаев и минут. ပြိုလဲဆုံးရှုံးမှု photodiodes သို့မဟုတ်အီလက်ထရောနစ်မြှောက်အပေါ်အခြေခံပြီးချောင်း microscopy, သုတေသီဒုတိယမှတဆင့်တစ်ဦးချင်းစီမော်လီကျူး၏အပြုအမူကိုစောငျ့ရှောကျဖို့ခွင့်ပြုခဲ့ခြင်း, အချို့ကိစ္စများတွင်ပင်မိနစ်။

ရှုပ်ထွေး

optical ဆူညံသံနောက်ခံများ၏ဖိနှိပ်မှု၏မျက်နှာသာအတွက်အဓိကပြဿနာ။ ကြောင့် filter များနှင့်မှန်ဘီလူး၏ဒီဇိုင်းအတွက်အသုံးပြုတဲ့ပစ္စည်းများအများအပြားအချို့ autofluorescence ပြဆိုတဲ့အချက်ကိုရန်, အစောပိုင်းအဆင့်အတွက်သိပ္ပံပညာရှင်များရဲ့အားထုတ်မှုတစ်ဦးအနိမ့်ချောင်းရှိခြင်းအစိတ်အပိုင်းများထုတ်လုပ်မှုမှ oriented ခဲ့ကြသည်။ သို့သော်နောက်ပိုင်းစမ်းသပ်ချက်အသစ်သောကောက်ချက်မှဦးဆောင်ခဲ့ကြသည်။ , основанная на полном внутреннем отражении, позволяет достичь низкого фона и высокоинтенсивного возбуждающего светового потока. အထူးသဖြင့်, သူကစုစုပေါင်းပြည်တွင်းရောင်ပြန်ဟပ်မှုအပေါ်အခြေခံပြီး, ထိုချောင်း microscopy ရှာတွေ့ခဲ့သည်, တကအနိမ့်နောက်ခံနှင့်မြင့်မားသောပြင်းထန်မှုစိတ်လှုပ်ရှားဖွယ်အလင်းအောင်မြင်ရန်ခွင့်ပြုပါတယ်။

စက်ကိရိယာ

, основанной на полном внутреннем отражении, заключаются в использовании быстрозатухающей или нераспространяющейся волны. စုစုပေါင်းပြည်တွင်းရောင်ပြန်ဟပ်မှုအပေါ်အခြေခံပြီးချောင်း microscopy ၏အခြေခံမူ, evanescent လှိုင်းသို့မဟုတ် evanescent ၏အသုံးပြုမှုသည်။ ဒါဟာကွဲပြားခြားနားသောနဲ့အတူမီဒီယာအကြားနယ်နိမိတ်မှာဖြစ်ပေါ် ယိုင်ညွှန်းကိန်း။ ဤကိစ္စတွင်ခုနှစ်, အလငျးရောင်ခြည်ဟာ Prism ကိုဖြတ်သန်း။ ဒါဟာမြင့်မားတဲ့မျက်စိအလင်းယိုင်ညွှန်းကိန်း parameter သည်ရှိပါတယ်။

အနိမ့် parameter သည်နှင့်အတူ aqueous ဖြေရှင်းချက်သို့မဟုတ်ဖန်ကပ်လျက်အဆိုပါ Prism ။ အလင်း၏တစ်ဦးရောင်ခြည်ကိုပိုပြီးစိုးရိမ်ရကြောင်းတစ်ထောင့်မှာမှာညွှန်ကြားထားလျှင်, ရောင်ခြည်လုံးဝကို interface ကနေရောင်ပြန်ဟပ်နေသည်။ ဤဖြစ်စဉ်, အလှည့်၌, လှိုင်းတံပိုး nonpropagating ကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်။ 200 nanometers ထက်လျော့နည်းနေတဲ့အကွာအဝေးတစ်ခုအောက်ပိုင်းယိုင်ညွှန်းကိန်း parameter နဲ့တစ်ဦးအလတ်စားသို့စိမ့်ဝင်သွားတယ်ရသောတနည်းအားဖြင့်ထုတ်လုပ်လိုက်တဲ့လျှပ်စစ်သံလိုက်လယ်ကွင်း။

အဆိုပါ evanescent လှိုင်း အလငျး၏ပြင်းထန်မှု fluorophores excite လုံလောက်ပါလိမ့်မယ်။ သို့သော်ကြောင့်ယင်း၏အလွန်သေးငယ်တဲ့အတိမ်အနက်ကို၏၎င်း၏အသံအတိုးအကျယ်အလွန်သေးငယ်ကြလိမ့်မည်။ အဆိုပါရလဒ်တစ်ခု low-level နောက်ခံဖြစ်ပါတယ်။

ပွောငျးလှဲခွငျး

ချောင်း microscopy စုစုပေါင်းပြည်တွင်းရေးရောင်ပြန်ဟပ်မှုအပေါ်အခြေခံသည်, epi-illumination နှင့်အတူအကောင်အထည်ဖော်နိုင်ပါသည်။ ဒီအမြင့်မားတဲ့ကိန်းဂဏန်းကို aperture (အနည်းဆုံး 1.4, ဒါပေမယ့်အဲဒါကို 1.45-1.6 ရောက်ရှိကြောင်းနှစ်လိုဖွယ်ဖြစ်ပါသည်) နှင့်တစ်စိတ်တစ်ပိုင်း illumination လယ်ကွင်းယန္တရားတွေနဲ့မျက်ကပ်မှန်လိုအပ်သည်။ အဆုံးစွန်သောသေးငယ်တဲ့အစက်အပြောက်အရွယ်အစားနှင့်အတူအောင်မြင်နေသည်။ စမ်းချောင်းတစ်ခုရှိရမည်ပိတ်ဆို့သောပါးလွှာသောလက်စွပ်, အသုံးပြု. သာ. ကြီးမြတ်တူညီနေမှုသည်။ စုစုပေါင်းရောင်ပြန်ဟပ်မှုလည်းမရှိသည့်ပြီးနောက်အရေးပါထောင့်သည်, ကျနော်တို့မှန်ဘီလူးအတွင်းနှစ်မြှုပ်ခြင်းအလတ်စားနှင့်အဏု၏အဖုံးဖန်၏အလင်းယိုင်တဲ့အဆင့်မြင့်လိုအပ်ပါတယ်။